灵芝抑制大肠癌细胞增生提高化疗药疗效

·癌细胞数目不增加

许世忠分别把灵芝子实体水萃取物（富含多糖类）和甲醇萃取物（富含三萜类），直接加入人类大肠直肠癌细胞株（Colo）一起培养，看癌细胞有什么变化。

经过七十二小时的作用之后，水萃取物的浓度即使高达和0mg/ml，癌细胞还是生长得很好的，细胞数量随着时间的推移仍不断增加；相对的，如果加入的是甲醇萃取物，在浓度0.3mg/ml时，癌细胞的生长形态也像水萃取物那组一样没有太大的影响作用，可是当浓度增加到3.0mg/ml时（十倍浓度差），癌细胞的生长速率即处于停滞状态，数量和实验刚开始差不多，没什么改变。

这表示，灵芝对大肠癌细胞的作用和过去对灵芝的熟知一样——多糖（水萃取物）不会直接影响癌细胞的存活，而三萜（醇萃取物）则可直接抑制癌细胞的增生，如果它的浓度增加到某个程度的话。

不过并非所有来自灵芝的三萜都有类似的作用。许世忠还另外观察了灵芝（G.lucidum）和台湾紫芝（G.formosanum）子实体甲醇萃取物对人类大肠直肠癌细胞株的存活影响，结果在同样实验条件下，前者的作用和的甲醇的萃取物差不多，只是效果略差一点；后者则是在相同的剂量下，没有明显的抑制作用。可见不同灵芝的三萜类，有不同的特性，无法一概而论。

·灵芝浓度影响抗疗效果

为了更进一步了解，灵芝甲醇萃取物对大肠癌的抑制作用，许世忠又透过两个体外实验，分别观察灵芝浓度与作用时间对癌细胞的影响。

结果发现，人类大肠直肠癌细胞株的存活率，与灵芝甲醇萃取物的浓度有正相关——低浓度（0.3和0.75mg/ml）时，癌细胞的存活没受到什么影响，但随着浓度增加（1.5、22.5和3.0mg/ml），癌细胞的存活率也越来越低。

再看同一浓度，作用时间长短对癌细胞数量的影响：短时间内（六小时内），有无添加灵芝甲醇萃取物，或其计量高低（0.3或3.0mg/ml），癌细胞数量都不具有显著性差异。但在四十八小时的时候，加入高剂量灵芝甲醇萃取物的癌细胞并没有大量增生，而未添加（实验对照组）或加入低剂量灵芝的癌细胞则大幅度增加。

·抗癌作用非毒杀，而是使癌细胞停止生长

上述实验结果，除了说明浓度会影响灵芝甲醇萃取物对大肠癌的抑制作用之外，也透露了这个集合了上百种三萜类的粗萃取物，可以让癌细胞数目不增加的原因。

许世忠解释，细胞数目下降代表死亡，维持原来的数量则表示细胞还活着，只是没有一直分裂增生。所以灵芝甲醇萃取物对大肠癌细胞的作用不在于毒杀，而是使它的生长周陷入停滞状态，不会再无限的一分为二，二分为四……地增生个不停。

后续的实验也证明，灵芝甲醇萃取物会使大肠癌细胞的细胞周期（细胞由一分为二的过程）停滞在G2（DNA复制）陷入M期（进行减数分裂）的过程中，而这个停滞点，与紫杉醇作用在大肠癌的结果是相似的。

·口服灵芝液有效，长不大的肿瘤威胁小

体外实验的结果也在动物实验里重现：许世忠先把人类大肠直肠癌细胞植入免疫功能不全的裸鼠背部，让肿瘤增长至一定的大小后，再比较有无给予灵芝甲醇萃取物的差别。结果发现，给大肠癌裸鼠连续二十一天口服灵芝甲醇萃取物（每天剂量：每公斤体重mg,其中甲醇完全挥发后，再改以乙醇回溶，以避免毒性），其肿瘤体质明显比没有吃灵芝的裸鼠小很多。

进一步化验两者的肿瘤组织可以发现，没有吃灵芝的裸鼠，肿瘤组织内细胞增生的现象非常活跃，但灵芝组裸鼠的肿瘤组织则有较多癌细胞死亡，且细胞增生的现象也显得低落。

癌细胞对人体健康有影响，就是因为它会不断长大。当肿瘤长到某种程度，癌细胞可能会转移带其它组织或脏器生长，甚至造成器官衰竭致死。所以只要肿瘤不再长大，就变得有点像良性肿瘤，比较不会影响到正常的生理运作，免疫系统要对付肿瘤也会比较容易。许世忠指出动物实验结果隐含的意义。

·肿瘤外干扁、内溃烂、透露玄机

由于裸鼠本身的免疫系统有缺陷，无法透过免疫系统抗肿瘤，因此可以确定，上述动物实验对大肠肿瘤的生长抑制，是灵芝甲醇萃取物经过肠胃道消化吸收后，直接作用的结果。而许世忠还因为这个实验，看到了灵芝甲醇萃取物抗大肠癌的另一个作用机制——抑制肿瘤血管新生。

肿瘤为了生长茁壮和向外扩散，会生长成新的微血管，与宿主本身的血管连线，以窃取其中养分来壮大自己。这也就是为什么没吃灵芝的大肠癌裸鼠，肿瘤长得又大又鲜红；反观灵芝组裸鼠身上的肿瘤，却干扁无血色，把肿瘤取出切开，中间的部分也已经烂掉。许世忠因而推断，灵芝甲醇萃取物有抑制肿瘤血管增生的作用。

大肠癌发展到最后，癌细胞扩散得很快，药物治疗常不理想，导致病人死亡率很高。如果灵芝甲醇萃取物确实能抑制肿瘤血管新生，并与临床药物并用，对于中晚期大肠癌的治疗，应能发挥一加一大于二的效果。许世忠说明先前的动物实验给他的启发，这也是为什么他后来会进一步探讨，灵芝甲醇萃取物对癌细胞分泌VEGF（血管内皮生长因子）的抑制作用，以及它与化疗药并用的疗效。

·抑制VEGF分泌，阻止肿瘤血管新生

VEGF是刺激肿瘤血管新生的幕后推手，少了它的刺激，肿瘤就无法新生血管，肿瘤自然长不大，也不易向外扩散和转移。

按照原本的思考脉络，许世忠应该采用大肠癌细胞，来探讨灵芝甲醇萃取物对VEGF的抑制作用才对，但考量过去学界在做抑制VEGF的研究时，大多是以上皮癌细胞为材料，所以后来他才改弦易辙，选用了人类上皮癌细胞（A），作为灵芝甲醇萃取物的试金石。

实验结果就如他当初推测的一样，随着灵芝甲醇萃取物投予剂量和作用时间的增加，癌细胞内VEGF蛋白的表现量明显下降，释放到癌细胞外的VEGF也相对减少。

·抑制EGFR，作用类似标靶药

癌细胞之所以会分泌大量的VEGF，主要和细胞表面的EGFR（第一型表皮生长因子受体，也称HER-1）异常活跃有关。

正常情况下，细胞上的EGFR并不会大量表现，但因为基因突变的缘故，某些癌细胞的EGFR会大量生成，进而活化癌细胞内一系列和它联动的蛋白分子，最后提高VEGF的蛋白表现。

而根据许世忠的研究显示，对于EGFR过度表现的人类上皮癌细胞，灵芝甲醇萃取物既可抑制EGFR，也能使癌细胞内PI3K、AKt、mTOR等与EGFR联动的分子活性明显降低，并减少VEGF的蛋白表现量。显然该萃取物是透过调控EGFR的讯息传导，把癌细胞分泌VEGF的作用压下来。

能够证明灵芝甲醇萃取物对于EGFR—PI3K—AKt—mTOR—……—VEGF这条路径有抑制作用，意义重大，因为临床常用的标靶乐艾瑞莎（Iressa），就是透过阻断这条讯息路径，抑制肺癌细胞的增生与转移。另外，Tarceva（得舒缓）和Erbitux（雨必得舒）等肺癌标靶药，也是透过抑制EGFR来控制癌症。

·经由口服，也能抑制肿瘤血管新生

进一步把灵芝甲醇萃取物，以管喂方式（每天剂量：每公斤体重mg），口服给予事先植入人类上皮癌细胞的裸鼠，经过二十一天的治疗后，确实能有效抑制肿瘤生长，且肿瘤组织里的EGFR和VEGF表现量明显减少。

以上对于灵芝甲醇萃取物抑制肿瘤血管新生的探讨，是许世忠的博士论文主题之二，此研究成果也在年受到国际科学期刊《CancerLetters》的肯定与刊登。

虽然实验中用的材料是人类上皮癌细胞，但由于大肠癌的病灶源头，也是从大肠上皮细胞的异常增生逐步发展而来，因此许世忠认为，抑制肿瘤血管新生的机制根本很可能也会发生在大肠癌细胞上，他希望能在不久的未来提出更直接的证据。

除了确认灵芝甲醇萃取物抑制大肠癌细胞生长的可能管道，许世忠还探讨了该萃取物与三种化疗药并用，对人类大肠直肠癌细胞的抑制效果。

其中5-氟尿嘧啶（5-UF）因为是作用在DNA层次，所以它与灵芝甲醇萃取物的并用效果较不明显。但如果把顺铂（Cisplatinum）或紫杉醇（taxol）两种以细胞毒为主要作用机制的化疗药，与低剂量（0.3mg/ml）的灵芝甲醇萃取物合用，那么顺铂只要原剂量的三分之一，紫杉醇只要原剂量的百分之一，就能有效抑制癌细胞——使存活的癌细胞数量减少二分之一以上。

很显然的，灵芝甲醇萃取物可以提高化疗药对大肠癌的治疗效果。许世忠表示，此实验结果为灵芝在治疗大肠癌的临床应用提供了很好的参考，除了可能减少化疗药的用量、降低药物副作用、减低医疗成本，对于某些治疗效果较差的大肠癌，以灵芝辅助治疗，或许能带来更多的希望。

·灵芝不只有效，也很安全

在进行灵芝抗大肠癌研究时，许世忠也探讨了灵芝甲醇萃取物的安全性，因为疗效固然重要，是否产生不良副作用更需要了解。

结果证实，口服灵芝甲醇萃取物的裸鼠，其脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肾上腺、肠道等器官，并没有出现淤血、发炎、出血或组织异常增生等不良反应，同时血液检查也显示，灵芝甲醇萃取物对肝、肾功能与白血球、红血球、血小板等，也没有不良影响。

显然，灵芝甲醇萃取物有很高的食用安全性。许世忠认为，此灵芝萃取物之所以疗效与安全兼具，应该和它本身是一个成分非常多元的复方三萜类有关，此特性更凸显出它不同于药物的价值。